Научно-производственное объединение "БиоТест Системы" предлагает Вам помощь в получении гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к требуемым антигенам. 

Получение гибридом проводится в течение 4-8 месяцев и включает следующие стадии: 

1. Предварительная оценка работы

На начальном этапе проводится оценка антигена Заказчика, его чистоты, количества, необходимости конъюгирования с носителем, методов скрининга гибридомных клонов. В случае пептидных антигенов, мы можем сами синтезировать требуемый пептид, очистить его и конъюгировать с носителем (см. подраздел СИНТЕЗ ПЕПТИДОВ). 

С учетом требований Заказчика, на 1-м этапе работы определяется объем работы и предлагается оптимальная схема получения гибридом. 

2. Иммунизация 

Проводится иммунизация 3-5 мышей BALB/c. В зависимости от типа антигена на иммунизацию одной мыши требуется 100-300 мкг антигена. Оптимальная схема иммунизации выбирается с учетом типа антигена. После 2-й иммунизации оценивается титр антител против антигена. В случае слабого иммунного ответа проводятся дополнительные иммунизации. 

3. Слияние и скрининг

Этот этап включает в себя подготовку миеломных клеток, бустерную иммунизацию мыши, слияние миеломных клеток со спленоцитами, селекцию гибридов на НАТ-среде, скрининг гибридомных клонов на синтез антител требуемой специфичности. На данном этапе, по желанию Заказчика, может быть проведено дополнительное исследование антител с помощью иммуноблоттинга или других методов. 3-6 положительнах клонов отбираются и замораживаются для дальнейшего клонирования. По желанию Заказчика, количество замороженных положительных смешанных клонов может быть увеличено. 

4. Клонирование

Отобранные положительные гибридомные клоны дважды клонируются методом редкого посева и по 10 мл культуральной жидкости от каждого клона передается Заказчику на тестирование. 

5. Заморозка клеток 

Положительные моноклоны замораживаются. 3 ампулы каждого клона и по 20 мл культуральной жидкости от каждого клона передается Заказчику. По желанию Заказчика, могут быть приготовлены 2 дополнительные ампулы для хранения в клеточном банке НПО "БиоТест Системы".

Мы можем наработать асцитные жидкости в требуемых Вам количествах (см. подраздел НАРАБОТКА АСЦИТНЫХ ЖИДКОСТЕЙ). Предоставляются также услуги по очистке антител (ДЭАЭ-Сефароза, белок-А Сефароза, белок-G Сефароза, иммунно-аффинная очистка антител), конъюгированию антител с ферментами (пероксидаза), флуорохромами (FITC), биотином и агарозой (см. подраздел ОЧИСТКА И КОНЪЮГИРОВАНИЕ АНТИТЕЛ).

Научно-производственное объединение "БиоТест Системы" предлагает синтез пептидов высокой степени чистоты по вашему заказу. Количество получаемого пептида варьирует от степени его чистоты и от размера пептида. Возможно получение киллограмовых количеств пептидов. Синтез осуществляется с использованием BOC- и FMOC-твердофазного синтеза, синтеза пептидов в растворе, сборки пептидов из фрагментов. По заказу синтезируются разветвленные пептиды.

Предлагаемые степени очистки пептидов - 70%, 80%, 90%, 95%, 98%. Очистка пептидов проводится методом препаративной HPLC. Контроль чистоты производится методом HPLC, аминокислотного анализа и масс-спектрометрии.

По желанию заказчика пептиды могут быть модифицированы. Предлагаются следующие модификации:

• Ацетилирование
• Бензилоксикарбонилирование
• Биотинилирование
• Дансилирование
• Динитробензоилирование
• Формилирование
• Фосфорилирование (серин)
• Фосфорилирование (треонин)
• Фосфорилирование (тирозин)
• Сукцинилирование
• Сульфирование

Пептиды могут быть модифицированы флуоресцентными красителями:

• Аминокумарин
• Bodipy
• FITC
• Лиссамин
• NBD
• Тетраметилродамин

Пептиды могут быть конъюгированы с бычьим сывороточным альбумином (BSA) и гемоцианином (KLH).

Научно-производственное объединение "БиоТест Системы" предлагает готовые антитела собственного производства.

 

Моноклональные мышиные антитела к иммуноглобулину IgG человека

Клон 505/23.
Иммуноген - IgG человека, очищенные с помощью белок А агарозы.
Чистота – не менее 95%.
Метод очистки – ДЭАЭ-сефароза.
Форма – раствор в 150 мМ NaCl, 10 мМ Na2HPO4, pH 7,5.
Концентрация – 1 мг/мл.
Количество – 1 мг.
Хранение -20 С, 12 месяцев.

 

Моноклональные мышиные антитела к иммуноглобулину IgG человека

Клон 8F4/D10.
Иммуноген - IgG человека, очищенные с помощью белок А агарозы.
Чистота – не менее 95%.
Метод очистки – ДЭАЭ-сефароза.
Форма – раствор в 150 мМ NaCl, 10 мМ Na2HPO4, pH 7,5.
Концентрация – 1 мг/мл.
Количество – 1 мг.
Хранение -20 С, 12 месяцев.

 

Моноклональные мышиные антитела к иммуноглобулину IgG человека

Клоны 9E6/B12/G7.
Иммуноген - IgG человека, очищенные с помощью белок А агарозы.
Чистота – не менее 95%.
Метод очистки – ДЭАЭ-сефароза.
Форма – раствор в 150 мМ NaCl, 10 мМ Na2HPO4, pH 7,5.
Концентрация – 1 мг/мл.
Количество – 1 мг.
Хранение -20 С, 12 месяцев.

 

Моноклональные мышиные антитела к иммуноглобулину IgG человека

Клон 707/A6/D7.
Иммуноген - IgG человека, очищенные с помощью белок А агарозы.
Чистота – не менее 95%.
Метод очистки – ДЭАЭ-сефароза.
Форма – раствор в 150 мМ NaCl, 10 мМ Na2HPO4, pH 7,5.
Концентрация – 1 мг/мл.
Количество – 1 мг.
Хранение -20 С, 12 месяцев.

 

Иммуноглобулин IgG человека

Получен из сыворотки крови человека от здоровых доноров. Сыворотки были проверены на отсутствие HBs антигена, на антитела к вирусу гепатита С, антигены ВИЧ p24, антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, возбудителю сифилиса.
Чистота – не менее 97%.
Метод очистки – белок А агароза.
Форма – раствор в 150 мМ NaCl, 10 мМ Na2HPO4, pH 7,5.
Концентрация – 1 мг/мл.
Количество – 1 мг.
Хранение -20 С, 12 месяцев.

 

Cорбент PrA-Sepharose

Описание: Рекомбинантный белок А Staphylococcus aureus, конъюгированный с Сефарозой CL-6B.
Форма – суспензия сорбента в буферном растворе, содержащем 150 мМ NaCl, 0,02 М Na-фосфатный буфер, 0,1% NaN3, pH 7,3.
Емкость – не менее 20 мг IgG человека на 1,0 мл сорбента.
Количество – 5 мл.
Хранение +4 С не менее 12 месяцев.

 

Сорбент PrG-Sepharose

Рекомбинантный белок G Streptococcus sp, конъюгированный с Сефарозой CL-6B.
Форма – Суспензия сорбента в буферном растворе, содержащем 150 мМ NaCl, 0,02 М Na-фосфатный буфер, 0,1% NaN3, pH 7,3.
Емкость – не менее 25 мг IgG человека на 1,0 мл сорбента.
Количество – 5 мл.
Хранение +4 С не менее 12 месяцев.

 

Конъюгат кроличьих антител к IgG мыши с пероксидазой хрена

Тип антител – поликлональные антитела.
Иммуноген – IgG кролика, очищенные с помощью белок G Сефарозы.
Метод очистки антител – иммуноаффинная очистка на IgG мыши, иммобилизованных на Сефарозе.
Форма – раствор в 150 мМ NaCl, 10 мМ Na2HPO4, pH 7,5, 1% БСА, 50% глицерина.
Концентрация – 1 мг/мл.
Количество – 1 мг.
Хранение -20 С не менее 12 месяцев.

 

Конъюгат кроличьих антител к IgG мыши с ФИТЦ

Тип антител – поликлональные антитела
Иммуноген – IgG кролика, очищенные с помощью белок G Сефарозы.
Метод очистки антител – иммуноаффинная очистка на IgG мыши, иммобилизованных на Сефарозе.
Форма – раствор в 150 мМ NaCl, 10 мМ Na2HPO4, pH 7,5, 1% БСА, 50% глицерина.
Концентрация – 1 мг/мл.
Количество – 0,5 мг.
Хранение -20 С не менее 12 месяцев.